紫外可見(jiàn)分光光度計光度準確度測試方法
紫外可見(jiàn)分光光度計光度準確度測試方法
用于紫外可見(jiàn)分光光度計的光度準確度測試的材料, 應該是純度高、穩定性好的物質(zhì)。這些物質(zhì)中最主要的是鉻酸鉀( K2 CrO4 , 一般在堿性溶液中)、重鉻酸鉀( K2 Cr2 O7 , 一般在酸性溶液中) 、硝酸鉀、中性濾光片等。在堿性溶液中的鉻酸鉀是一種好材料, 但是因為含有堿性, 不能儲藏在普通玻璃容器中, 而需要儲藏在石英器皿中, 硝酸鉀本身不大穩定。這些都限制了它們的使用。因此, 最好選擇易于純化又溶于酸性介質(zhì)中的物質(zhì), 并且它們的稀溶液也是很穩定的。因此, 重鉻酸鉀的0. 005mol/ L H2 SO4 溶液經(jīng)常被使用。許多科學(xué)家認為, 用紫外濾光片來(lái)測試紫外可見(jiàn)分光光度計的光度準確度, 具有很大的優(yōu)點(diǎn)。因為它們的穩定性更好, 又便于攜帶, 還有許多優(yōu)點(diǎn)將在后面討論。紫外可見(jiàn)分光光度計的光度準確度測試方法, 目前國內外各生產(chǎn)廠(chǎng)家作法不一, 其主要原因是各國的國家標準不同; 如美國國家標準規定: “選擇合適的標準參比材料, 在規定的波長(cháng)處, 連續測10 個(gè)吸光度或透射比讀數, 取10個(gè)讀數的平均值, 實(shí)際吸光度或透射比與觀(guān)測值的平均值之差, 即為光度準確度”。美國國家標準還規定了計算光度準確度的標準偏差S 的方法; 規定指出吸光度準確度用AA 表示, 則有式( 4-10) 、式( 4-11) 中, S 為標準偏差; Ai 或T i 為每次測量時(shí)吸光度或透射比的讀數值; Aa 或Ta 為吸光度或透射比的平均值; n 為測量次數( 一般取5～7 次)。
美國NBS 規定, 在可見(jiàn)區用930 標準片來(lái)測定光度準確度, 其標準透射比值分別為10%、20%、30%的中性玻璃濾光片。規定還指出也可用NBS 的931 , 它是一種溶液。而在紫外區內, 則規定用NBS 的203 來(lái)測定光度準確度; 它是一種標準透射比值分別為90%、30%、10% 熔融石英濾光片。此外,美國標準還規定在紫外區內, 用戶(hù)還可以自己配置高純度的化合物溶液來(lái)測定光度準確度。為此, 美國NBS 已發(fā)布了鉻酸鉀(K2 CrO4 )、重鉻酸鉀( K2 Cr2 O7 )等標準物質(zhì)可供選用。
我國在1992 年制訂的紫外可見(jiàn)分光光度計國家標準中規定, 用重鉻酸鉀溶液來(lái)測試紫外區的光度準確度, 并明確指出了測試波長(cháng)。在可見(jiàn)光區規定可用中性濾光片來(lái)檢測光度準確度, 其標準片的透射比值分別為10%、20%、40%左右; 同時(shí)還規定在紫外可見(jiàn)整個(gè)區間, 都可用中性濾光片來(lái)檢測光度準確度, 其標準片的透射比值也分別為10%、20%、40%左右。
安徽省計量測試研究所和國家標準物質(zhì)研究中心共同研制的紫外光區透射比標準濾光片, TA 優(yōu)于0. 2% , 穩定性?xún)?yōu)于0. 1% , 其測試波長(cháng)分別為270nm、293 nm 和350 nm, 相應的透射比標準值各為11. 4%、3. 9%、52. 9%左右。用來(lái)測試日本島津公司的UV-260 紫外可見(jiàn)分光光度計和無(wú)錫高速分析儀器廠(chǎng)生產(chǎn)的WFZ-753 型紫外可見(jiàn)分光光度計的光度準確度, 具體操作時(shí),以空氣作參照, 對規定的波長(cháng)處各測7 次, 取其平均值, 與標準值相減, 則得到各規定的波長(cháng)處的TA 。而后, 取三個(gè)規定波長(cháng)中最差者作為被測紫外可見(jiàn)分光光度計儀器的透射比準確度。再根據式( 4-2 ) , 求得被測儀器在各規定的波長(cháng)處的透射比準確度, 然后以三個(gè)規定波長(cháng)中的最差者作為被測儀器的透射比準確度。
影響紫外分光光度計光度準確度的因素很多, 主要因素有雜散光、噪聲、基線(xiàn)平直度、光譜帶寬等, 將在后面討論。
